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方法介绍

靶向代谢物分析主要用于分析样品中已知代谢物的含量，如分析植物组织、细胞、血液和其他生物样本中内源代谢物的含量，人或动物体内药物及其代谢物的组成及含量。在进行靶向分析时，通常使用固相萃取和液液萃取等技术对目标物质进行选择性提取与富集，排除干扰物质，以提高检测的灵敏度和特异性。使用液相色谱对经过提取和净化处理的样品进行分离，进一步排除样品基质对待测物质检测的干扰，最后使用质谱对其进行检测。

生物质谱实验室现有的 Q-Exactive Focus 四极杆-轨道阱高分辨质谱仪，采用一级全扫结合靶标二级扫描的方法，对待测物质离子进行选择性检测，检测灵敏度可以达到 1 ppb（十亿分之一），可以对样品中微量的代谢物进行定量分析。通过分析已知浓度的标准品，建立工作曲线，然后分析样品中目标物质的质谱峰强度，将其代入工作曲线，可以对样品中待测物质的含量进行绝对定量分析。

实验流程

用户提供植物组织、动物组织、细胞、血液或体液等样品，根据检测物质不同加入相应的提取液（80%-100%甲醇、乙腈或其他提取液）后，均质匀浆、超声或振荡提取其中的代谢物。取上清离心后，根据实验目的可以直接对提取液（或其稀释液）进行质谱分析，也可以将提取液浓缩后进行分析，或者使用固相萃取小柱（SPE）对样品进行净化后，再使用质谱进行分析。

目前生物质谱实验室已建立的靶向代谢物分析方法包括：

植物激素：脱落酸、水杨酸、生长素、茉莉酸、ZT玉米素、OPDA 12-氧-植物二烯酸。

氨基酸（41种）：β-丙氨酸、丙氨酸、氨基已二酸、γ-氨基丁酸、氨基丁酸、β-氨基丁酸、氯化铵、鹅肌肽、精氨酸、天冬氨酸、肌肽、瓜氨酸、肌酸酐、胱硫醚、丙氨酸丁氨酸硫醚、胱氨酸、乙醇胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、高胱氨酸、羟基赖氨酸、羟脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、1-甲基组氨酸、3-甲基组氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、肌氨酸、丝氨酸、牛磺酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸、天冬酰胺

其他代谢物：丁布、超长链脂肪酸、花色素和花青素、胆碱、多胺、有机酸、前列腺素（PGD2/PGE2）、视黄酸、布卢门醇C、葫芦素C、多酚、茉莉酮等。

送样要求

为确保实验结果的准确性，植物组织建议提供 100 mg~1 g，动物组织建议提供 30~200 mg，细胞建议提供 5×10⁶~1×10⁷个，微生物建议提供 1×10⁷~1×10⁸个，体液（血清、血浆、脑脊液、淋巴液、尿液、唾液、透析液等）建议取样 100~200 μL，上述样品需准确称重或量取体积。请提供尽可能详细的被测物质信息及其测定方法信息（包括但不限于目标化合物名称、CAS号、结构式、文献或其他来源的测定方法等），以便质谱实验室建立样品分析方法。请尽可能提供被测物的标准品，如需质谱实验室协助购买标准品，请耐心等待货期。

实验结果

使用内标法或者外标法和质谱仪自带的定量数据分析软件对待测物质的含量进行定量分析，得到待测物在样品中的绝对含量。质谱实验室会将实验结果以电子邮件形式发送到用户的注册邮箱中，实验原始数据保存在质谱实验室服务器上，用户可以按需拷贝。